1实验部分

1.1仪器和试剂

1290 HPLC-Bruker Maxis Q-TOF型高效液相色谱-高分辨串联质谱联用仪（HPLC-MS/MS，美国Agilent公司）；LC-WB-4型磁力搅拌水浴锅（上海力辰邦西仪器科技有限公司）；JZ-200A型自动界面张力仪（芬兰Kibron公司）；Foamscan型全自动泡沫分析仪（法国Teclis公司）。

SLs产品：野生型菌株生产的SLs产品是以葡萄糖和油酸为底物，经发酵后自然沉淀得到系列同系物，大部分具有乙酰基，简称为“乙酰化SLs”；去乙酰化菌株生产的SLs产品是以葡萄糖和油酸为底物，经发酵后使用乙醇萃取，在55℃减压去除乙醇溶剂后得到，简称为“去乙酰化SLs”。

乙酸乙酯、无水乙醇、硫酸、甲酸、无水碳酸钠、连二硫酸钠、无水氯化钙、氯化钠和液体石蜡均为分析纯试剂，氢氧化钠和硫化钠为化学纯试剂，以上试剂均购自国药集团化学试剂有限公司；松节油和棉籽油为分析纯试剂，购自上海迈瑞尔生化科技有限公司。

1.2乙酰化SLs和去乙酰化SLs同系物的结构鉴定

HPLC-MS/MS的色谱柱为Waters ACQUITY UPLC BEH130 C18 2.1 mm×150 mm×1.7μm。实验条件：流动相A：0.1%甲酸、1%乙腈水溶液；流动相B：0.1%甲酸乙腈；流速为0.2 mL/min；等度洗脱条件为：80%B。柱温：30℃，进样量：1μL，UV检测波长：207 nm，无分流进入质谱。质谱：电喷雾正离子模式；扫描范围m/z 200~1000；毛细管电压：4.5 kV；喷雾气压1.03×104 Pa；干燥气（N2）流速：6 L/min；气体温度：180℃；分辨率：50000。

1.3理化性能测试方法

1.3.1溶解性、浊点和耐酸碱性

溶解度测定：量取100 mL去离子水于烧杯中，逐步加入溶质其中至恰好饱和，计算浓度。浊点的测定参考GB/T 5559-2010。耐酸碱性检测方法参考GB/T 5555-2003和GB/T 5556-2003，抗硬水性测试参考GB/T 7381-2010。

1.3.2表面性能

通过铂环法在室温下进行表面张力测定，参考GB/T 5549-2010。绘制出表面张力-浓度对数（γ-lg c）曲线。使用公式（1）和（2）对饱和吸附量（Гmax）和单个分子占据最小表面积（Amin）进行计算。

式中，Гmax是饱和吸附量（μmol/m2）；γ为表面张力（mN/m）；R为摩尔气体常数（8.314 J/（mol·K））；T为热力学温度（K）；ρ为表面活性剂的质量浓度（mg/L）；（∂γ/∂logρ）T是表面张力与浓度对数关系曲线的斜率；Amin是单个分子占有的最小表面积（nm2）；NA为阿伏伽德罗常数（6.022×1023/mol）。

1.3.3亲水-亲油平衡值

采用乳化法来测定HLB值，即通过观测样品对确定HLB值的混合植物油的乳化稳定性来评价样品的HLB值。具体方法为：使用松节油（HLB值为16）和棉籽油（HLB值为6）配制一系列不同HLB值的油相，每19份油相中加入80份水和1份待测样品，搅拌乳化，稳定10 min后读取乳化层高度，乳化层高度最高的试样中对应油相的HLB值即为待测试样的HLB值。

1.3.4泡沫性能

使用泡沫分析仪通过多孔介质向400 mL待测液体（1 g/L）内注入气体而产生泡沫，记录2种SLs起泡后稳定30 s和5 min的泡沫量，使用公式（3）计算2种SLs的泡沫稳定性：

式中，Sfoam为泡沫稳定性，V5 min为静置5 min后的泡沫体积（mL），V30 s为静置30 s后的泡沫体积（mL）。为了对比分析SLs在不同盐度（S）下的泡沫性能，在氯化钠质量浓度为0、10、100、200、400、600、800和1000 mg/L的溶液中测定30 s泡沫量，方法同上。

1.3.5乳化性能

取40 mL待测溶液（1 g/L）、40 mL液体石蜡，加入到100 mL具塞量筒中，剧烈摇动后开始计时，记录分出10 mL水相所用时间。